离心机在茄根多糖的提取分离中的应用

导读:采用超声波辅助提取，水提醇沉法析出粗多糖。精制后的多糖，采用苯酚-硫酸法显色，以葡萄糖为标准品，利用紫外-可见分光光度法在490nm波长处测定吸光度，测定茄根中多糖的含量。

来源：未知发布日期：2019-09-26 14:56【大中小】

茄在我国广泛分布和种植，一般茄子收获完毕，茄根便当柴烧，对药用资源是一种极大的浪费。上海安亭科学仪器厂通过文献调研发现，对茄根的研究并不多，主要是对茄根中的酚类、生物碱、苯丙酸类等化合物进行提取分离、含量测定和药理活性等方面的研究，但并未见对茄根中多糖的相关研究。本实验上海安亭科学仪器厂就采用苯酚-硫酸法测定茄根中多糖的含量，为茄根药材的质量控制提供参考依据。

1仪器
旋转蒸发仪(型号:N-1300V型，生产厂家:东京理化器械株式会社);循环水式多用真空泵(型号:SHZ-DⅢ，生产厂家:上海科兴仪器有限公司);电子分析天平(生产厂家:赛多利斯科学仪器（北京）有限公司);紫外可见分光光度计(型号:GoldS54，生产厂家:上海棱光技术有限公司);数控超声波清洗器(型号:KQ5200DE型，生产厂家:昆山市超声仪器有限公司);台式电热干燥箱(型号:202-2AB型，生产厂家:天津市泰斯特仪器有限公司);水浴锅(型号:HH.S11-Ni2型，生产厂家:北京三二八科学仪器有限公司);台式低速离心机(生产厂家:上海安亭科学仪器厂);纯水仪(生产厂家:MILLIPOＲE)。

2方法
2.1茄根多糖的提取与精制工艺
样品处理→脱脂→浸提→抽滤除渣→减压浓缩→离心→乙醇沉淀多糖→静止离心→粗多糖→复溶→脱蛋白→醇沉→干燥→精制多糖。

2.2工艺要点说明
样品处理:将茄根除去杂质，置于恒温干燥箱中烘干，粉碎备用。脱脂:称取药材5.0g，置于250mL具塞锥形瓶中，加入50mL石油醚，密塞后，振摇，超声(40℃，频率40kHz)提取30min，脱去其表面脂类物质，抽滤，晾干，重复脱脂1次。
浸提:脱脂晾干后试样，以1∶20的料液比加入蒸馏水，在40℃水浴中超声浸提30min，过滤后，在相同条件下重复提取1次。
抽滤除渣:将2次提取液合并，减压抽滤。减压浓缩:利用旋转蒸发仪浓缩滤液，约至20mL，冷却至室温。
离心和醇沉:将浓缩液离心5min(5000r/min)，弃去沉淀后，缓慢加入无水乙醇(约3倍量)，不断用玻璃棒搅拌，使多糖充分析出。静置离心:将上述溶液静置1d后，在上海安亭科学仪器厂离心机上离心得粗多糖沉淀。复溶和脱蛋白:粗多糖复溶，利用Sevage试剂除蛋白，连续操作到脱除蛋白质完全。
醇沉:在除去蛋白后的溶液中加入无水乙醇(3倍量)沉淀，依次用石油醚、丙酮、乙醇反复洗涤，离心，干燥，得精制多糖。

2.3样品中多糖的含量测定
精密称取茄根粉末5.0g，利用石油醚于超声条件下脱脂2次，抽滤，将滤渣风干后加超纯水超声提取2次后，抽滤，合并2次滤液，浓缩后加3倍量无水乙醇，静置过夜，离心，沉淀复溶，定容至100mL，摇匀，作为样品溶液。吸取1.0mL，按照上述标准曲线操作步骤，测其吸光度。多糖含量(%)=样品液中葡萄糖的浓度(mg/mL)×样品液的稀释倍数×测定液总体积(mL)/样品的重量(mg)。

3结论
本实验上海安亭科学厂采用超声波辅助法对茄根中的多糖进行提取，用苯酚-硫酸法测其含量。在苯酚-硫酸法的条件下，测得茄根多糖含量平均为4.5%。该实验的标准曲线线性关系良好，多糖含量测定结果稳定，重现性好，回收率高，说明苯酚-硫酸法可以用于测定茄根中多糖含量，具有一定的推广和参考价值，同时也为茄根药材的质量控制提供了参考依据。

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离心机在茄根多糖的提取分离中的应用

导读:采用超声波辅助提取，水提醇沉法析出粗多糖。精制后的多糖，采用苯酚-硫酸法显色，以葡萄糖为标准品，利用紫外-可见分光光度法在490nm波长处测定吸光度，测定茄根中多糖的含量。

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