离心技术分离稳定DNA的方法研究

导读:超速离心机是分子生物实验室最常用的科研仪器之一，能将具有不同沉降系数、质量和密度的混合物在离心机高速旋转产生的离心力场作用下进行快速分离、浓缩和纯化。密度梯度区带

来源：未知发布日期：2020-03-11 11:05【大中小】

超速离心机是分子生物实验室最常用的科研仪器之一，能将具有不同沉降系数、质量和密度的混合物在离心机高速旋转产生的离心力场作用下进行快速分离、浓缩和纯化。密度梯度区带离心法(简称区带离心法)，是超速离心机常用的一种离心方法，在一定的离心力下将加入惰性梯度介质的样品进行离心沉降，把所需的颗粒分配到梯度中某些特定位置，形成不同区带的分离方法。该法能够在保持颗粒活性条件下很好地将不同颗粒的物质进行分离。

密度梯度离心技术是实现 SIP-DNA 样品分离的关键技术，本研究通过实验获得了超速离心机分离SIP-DNA样品的最佳条件（以CsCl为惰性介质，在20℃，45000g离心48小时，离心后分为14层）。根据每层的浮力密度和DNA浓度这两个参数可以判定分离是否成功，成功分离后的重的同位素样品与正常样品相比不仅相同层数浮力密度大，在相同浮力密度层DNA浓度最大位置也会比较靠后。

该技术可为后续16SrRNA高通量测序提供前提和保障。根据高通量数据结果可以从整体水平上反应环境样品微生物群落水平，也可以更准确的认识自然条件下微生物的作用与具体的功能微生物。

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