TDL-5000bR台式冷冻离心机可对软骨细胞的体外分离，文中先，介绍软骨细胞的体外分离与培养所需要用到的仪器和试剂，在简单介绍上海安亭TDL-5000bR台式冷冻离心机对细胞的体外分离的具体操作方法。
1、材料和方法
上海安亭科学仪器厂首先介绍材料之实验试剂与仪器：
(1)、实验设备：倒置相差显微镜(日本Olympus公司)；5%CO2孵育箱(美国Thermo Fisher公司)；VCX 130PB型超声波破碎仪(美国Sonics公司)；EPOCH TAKE 3微量孔板分光光度计(美国BioTek公司)；TDL-5000bR通用台式冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)。
(2)、实验试剂：α-MEM培养基(美国Gibco公司，规格500mL，货号12571063)；PBS缓冲液(美国Corning公司，规格500mL，货号21-040-CVR)；Ⅱ型胶原酶(美国Gibco公司，规格1g，货号17101015)；HBSS缓冲液(美国Gibco公司，规格500mL，货号17101015)；胎牛血清(美国Gibco公司，规格500mL，货号10099141)；二甲基亚砜(美国Sigma公司，规格100mL，货号D2650)；BCA蛋白定量试剂盒(中国联科生物公司，号A81911125)；PVDF膜(美国Millipore公司，0.45μm，货号R8HA7852)；蛋白酶抑制剂(美国Roche公司，货号04693116001)；脱脂奶粉(中国Easybio公司，货号BE6250)；GAPDH单克隆抗体(美国Abcam公司，规格100μL，货号ab8245)；Col2a多克隆抗体(美国Abcam公司，规格100μg，货号ab34712)；MMP-13多克隆抗体 ( 美国Abcam公司，规格100μg ，货号ab39012)；Aggrecan单克隆抗体(美国Abcam公司，规格1mL，货号ab3778)。
2、上海安亭科学仪器厂介绍利用TDL-5000bR台式冷冻离心机对细胞的体外分离实验方法：
人骨关节炎软骨组织的取材：于全膝关节置换术中取下废弃的软骨组织标本，立刻低温无菌保存，30min内转移至实验室超净工作台内。使用11号刀片(带柄)小心刮除关节周围附着的组织，PBS织液，15号刀片(带柄)逐层削取关节软骨片，注意避开胫骨平台周围骨质增生部分及其表面的纤维软骨，PBS漂洗3次，将组织移入含少量培养基的小瓶内，无菌眼科剪将组织粉碎为1mm3以下的组织块。
软骨细胞的分离、培养与传代：将组织块移入10cm培养皿中，分别加入10倍体积含0.2%Ⅱ型胶原酶的α-MEM培养液与2倍体积的HBSS缓冲液，置于37℃孵育箱中消化，一般消化4-6h；然后将含有组织块的液体移入上海安亭科学仪器厂的15mL离心管中，置于上海安亭TDL-5000bR台式冷冻离心机中设置1200r/min离心5min，弃去上清液，加入含体积分数为15%胎牛血清的α-MEM培养液终止消化。所得组织与细胞沉淀经吹打混匀后种入25cm2培养瓶中，置于37℃恒温、体积分数为5%CO2、饱和湿度培养箱内培养，每48h更换培养液1次。
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