上海安亭科学仪器厂

服务热线:021-58201756
17621554455

他们都在找: 上海安亭TGL-16G高速台式离
当前位置主页 > 技术支持 >

酶标板转子离心机如何离心细胞制片?

导读:上海安亭科学仪器厂在文中介绍一种酶标板转子低速离心细胞制片的方法。


返回列表 来源:未知 发布日期:2019-05-31 16:55【
上海安亭科学仪器厂酶标板转子型号有,LXJ-IIB低速大容量多管离心机,这款是非常常卖的一款设备,容量大,最大可离心500mlx6,主要还能配备酶标板转子,96孔的,文中介绍一种酶标板转子低速离心细胞制片的方法。
摘要:常规培养悬浮细胞,离心收集细胞后,通过载玻片直接涂片、细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机 3 种方法制备细胞涂片,经瑞氏 - 姬姆萨染色后,显微镜下观察拍照。发现直接涂片中细胞图像难以观察,效果差,而细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机制备的细胞涂片,细胞图像清晰,均可达到细胞制片要求。 酶标板转子低速离心细胞制片是一种便捷的新方法,下图为上海安亭
LXJ-IIB低速大容量多管离心机介绍:
 

关键词:酶标板转子、上海安亭离心机、细胞制片
将液体样本均匀地涂布在载玻片上, 形成可以在显微镜下直接观察细胞形态和结构变化的细胞涂片,是常用的生物医学实验手段。从机体组织或培养的细胞到肉眼观察成像, 整个操作过程需要良好的技术和丰富的经验。 如果细胞涂片需要长期保存或其他进一步操作如细胞染色等, 干燥固定是必不可少的处理措施, 虽然已有商品化的专用细胞涂片离心机, 但此技术在设备和方法上仍然存在着发展空间。 上海安亭LXJ-IIB低速大容量多管离心机可以直接制备细胞涂片,贴壁培养大肠癌细胞株细胞经离心机制片,保持了细胞贴壁生长的原来形状 。

1、材料和方法
1.1、材料:白血病T淋巴细胞株为本实验室保存,小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)、 RPMI1640培养液(杭州吉诺生物医药技术有限公司)、载玻片(江苏飞舟玻塑有限公司帆船牌)、瑞氏 - 姬姆萨染色液;细胞涂片离心机(美国 cytospin ),LXJ-IIB酶标板转子低速离心机(上海安亭科学仪器厂)。

1.2、方法
1.2.1、细胞培养细胞株培养于含10%小牛血清的RPMI1640( 加100 U/mL青霉素 、100U/mL链霉素)细胞培养基中,换液培养瓶中约一半液体传代,加入相近量的细胞培养基,置于细胞培养箱中,待细胞培养室呈对数生长时备用。
1.2.2、细胞涂片制备与染色收集上述细胞 ,置于上海安亭离心机中800r/min离心5min,去上清液,加入PBS洗涤 1次,然后调整细胞浓度为1×106mL ,分别取等量的细胞进行3种方法制片。 直接涂片法,取20μL细胞悬液均匀涂布载玻片,然后置于室温干燥;细胞涂片离心机法取等量的细胞,然后加200μL的PBS稀释,安装好载玻片加样置于上海安亭离心机中500r/min离心3min ;酶标板转子低速离心机法,先用透明胶带固定载玻片上下端在酶标板上, 然后取20μL细胞悬液均匀涂布载玻片, 立即置于上海安亭科学仪器厂离心机中酶标板转子上500 r/min离心3min 。 离心后取出载玻片置于室温干燥,均加数滴甲醇固定,任其挥发干燥,然后瑞氏 - 姬姆萨染色,干燥后显微镜下观察,CCD拍照。

2、结果
 3 种方法制备的细胞涂片, 直接涂片法中制备的细胞涂片(A)细胞固缩,面积变小,染色深沉,细胞质核界限不清,难以看清细胞内部结构,整个图像效果差,达不到细胞制片要求。而用上海安亭科学仪器厂生产的细胞涂片离心机和酶标板转子低速离心机制备的细胞涂片(B\C)细胞均保持培养体系中原来大小,细胞核、质界限分明,细胞质蓝色,细胞核深紫,也可见分裂相细胞,整个图片清晰,经超过5张以上的细胞制片显微镜下观察,图像B\C均优于A,符合细胞制片要求,且 B 、 C 细胞染色效果没有差异。第3种方法因直接涂片离心, 不需要过多的前期准备及后期配件清洗,操作过程更为便捷。
 
现有的细胞涂片技术, 较简单的方法是直接涂布于载玻片上, 复杂方法需使用专用细胞涂片离心机,首先将载玻片置于该设备玻片匣里,垫一张自制带孔载玻片大小的滤纸, 扣牢放入上海安亭离心机转盘中,将处理好的细胞加入进样孔,以一定速度离心,取出载玻片,最后清洗设备玻片匣备用。 直接涂布制片后染色,如图 1A 细胞变形、缩小,效果差。 细胞涂片离心机制片效果好 ,细胞保持原状,染色效果理想,符合生物医学制片要求,与培养体系中理想细胞形态和结构保持一致。 并且此法仅仅是将载玻片用透明胶带固定在酶标板上, 在原有的酶标板转子低速离心机中离心而已,离心机是生物学教学、科研领域中常见的仪器 ,并没有增加设备和耗材。 而且整个过程不需要太多的前期准备工作和后期的清洗负担,也可用于其他来源的组织体液样本,尤其适合高校教学,培养大学生实践创新能力。此方法要求操作迅速, 不同样本的离心速度和时间也不尽相同。 总之,以保留细胞、快速干燥细胞外而不损失细胞内水分为准则。
上海安亭科学仪器厂介绍的以上文章仅供大家参考。